瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或者瓊脂糖作支撐介質的一種電泳辦法。關於成員量較大的樣品，如大成員核酸、野病毒等，正常可采納孔徑較大的瓊脂糖凝膠停止電泳結合。
原理編者
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支撐介質的一種電泳辦法。其綜合原理與其餘支撐物電泳最次要差別是：它兼有“成員篩”和“電泳”的雙重作用。
瓊脂糖凝膠存正在網絡構造，精神成員經過時會遭到屏障，大成員精神正在湧動時遭到的屏障大，因而正在凝膠電泳中，帶電顆粒的結合沒有隻起源於淨點電荷的本質和單位，並且還起源於成員大小，這就大大進步了區分威力。但因為其孔徑相比於蛋白腖太大，對於大少數蛋白腖來說其成員篩效應微有餘道，現寬泛使用於核酸的鑽研中。
蛋白腖和核酸會依據pH沒有同帶有沒有同點電荷，正在磁場中受力大小沒有同，因而跑的進度沒有同，依據某個原理可將其離開。電泳緩衝液的pH正在6——9之間，離子強度0.02——0.05為最適。罕用1%的瓊脂糖作為電泳支撐物。瓊脂糖凝膠約可辨別相差100bp的DNA片段，其區分率雖比聚丙烯酰胺凝膠低，但它製備簡單，結合範疇廣。一般瓊脂糖凝膠結合DNA的範疇為0.2-20kb，應用脈衝電泳，可結合高達10^7bp的DNA片段。
成員正在瓊脂糖凝膠電泳中泳動時有點電荷效應和成員篩效應。DNA成員正在高於等電點的pH濾液中帶負點電荷，正在磁場中向陽極挪動。因為糖-鹽酸骨子正在構造上的反複本質，相反單位的雙鏈DNA簡直存正在等量的淨點電荷，因而它們能以異樣的速率向陽極位置挪動。
操作流水線編者
預備醃臢的配膠板和電泳槽
瓊脂糖凝膠電泳：程度電泳
瓊脂糖凝膠電泳：程度電泳
留意DNA酶淨化的儀表能夠會降解DNA，形成條帶信號弱、依稀以至缺失的景象。
電泳辦法
正常的核酸檢測隻要要瓊脂糖凝膠電泳就能夠；假如需求區分率高的電泳，尤其是隻要多少個bp的差異該當取舍聚丙烯酰胺凝膠電泳；用一般電泳沒有適合的碩大DNA鏈該當運用脈衝凝膠電泳。留意碩大的DNA鏈用一般電泳能夠跑沒有出膠孔招致缺帶。
凝膠深淺
關於瓊脂糖凝膠電泳，深淺一般正在0.5——2%之間，低深淺的用於停止大片段核酸的電泳，深奧淺的用於停止小片段綜合。低深淺膠易碎，不慎操作和運用品質好的瓊脂糖是處理方法。留意深奧淺的膠能夠使成員大小近似的DNA帶沒有易區分，形成條帶缺失景象。
緩衝液
罕用的緩衝液有TAE和TBE，而TBE比TAE有著更好的緩衝威力。電泳時氣用新製的緩衝液能夠顯然進步電泳成效。留意電泳緩衝液屢次運用後，離子強度升高，pH值下降，緩衝功能降落，能夠使DNA電泳發生條帶依稀和沒有規定的DNA帶遷徙的景象。
電壓和量度
電泳時電壓沒有該當超越20V/cm，電泳量度該當低於30℃，關於碩大的DNA電泳，量度該當低於15℃。留意假如電泳時電壓和溫渡過高，能夠招致湧現條帶依稀和沒有規定的DNA帶遷徙的景象。尤其是電壓太大能夠招致小片段跑出膠而湧現缺帶景象樣品的純度和形態留意樣品中含鹽量太高和含雜質卵白均能夠發生條帶依稀和條帶缺失的景象。酒精積澱能夠去除必要的鹽，用酚能夠去除卵白。留意變性的DNA樣品能夠招致條帶依稀和缺失，也能夠湧現沒有規定的DNA條帶遷徙。正在上樣前沒有要對於DNA樣品加熱，用20mM NaCl緩衝液濃縮能夠預防DNA變性。
的上樣
準確的DNA上樣量是條帶明晰的保障。留意太多的DNA上樣量能夠招致DNA帶型依稀，而太小的DNA上樣量則招致帶信號弱以至缺失。
的取舍
電泳定然要運用DNA Marker或者已知大小的正比例照DNA來約莫DNA片段大小。Marker該當取舍正在指標片段大小左近ladder較密的，那樣對於指標片段大小的約莫才比擬精確。需求留意的是Marker的電泳異樣也要相符DNA電泳的操作規範。假如取舍λDNA/HindIII或者許λDNA/EcoRI的酶切Marker，需求事後65℃加熱5min，冰上結冰後運用。從而防止HindIII或者EcoRI酶切形成的粘性接頭招致的片段聯接沒有規定或者條帶信號弱等景象。
凝膠的紡織和視察
試驗室罕用的核酸紡織劑是溴化乙錠（EB），紡織成效好，操作便當，然而穩固性差，存正在毒性。留意視察凝膠時應依據顏料沒有同運用適合的光源和激起跨度，假如激起跨度沒有對於，條帶則沒有易視察，湧現條帶依稀的景象。
回整編者
片段的膠回收辦法
電泳洗脫法
低熔點瓊脂糖凝膠電泳挖塊法
凍融回收法
玻璃奶回收法
柱回收法
膠回收容意須知
將電泳槽用ddH2O重複蕩滌醃臢，倒入鮮活配製的滅鼠電泳緩衝液；依據點樣量製備適合薄厚的瓊脂糖凝膠板；切膠時盡能夠切掉沒有含DNA片段的凝膠；
要過分縮小DNA正在紫外下的照耀工夫以縮小對於DNA的損害；熔膠要徹底。
原理編者
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支撐介質的一種電泳辦法。其綜合原理與其餘支撐物電泳最次要差別是：它兼有“成員篩”和“電泳”的雙重作用。
瓊脂糖凝膠存正在網絡構造，精神成員經過時會遭到屏障，大成員精神正在湧動時遭到的屏障大，因而正在凝膠電泳中，帶電顆粒的結合沒有隻起源於淨點電荷的本質和單位，並且還起源於成員大小，這就大大進步了區分威力。但因為其孔徑相比於蛋白腖太大，對於大少數蛋白腖來說其成員篩效應微有餘道，現寬泛使用於核酸的鑽研中。
蛋白腖和核酸會依據pH沒有同帶有沒有同點電荷，正在磁場中受力大小沒有同，因而跑的進度沒有同，依據某個原理可將其離開。電泳緩衝液的pH正在6——9之間，離子強度0.02——0.05為最適。罕用1%的瓊脂糖作為電泳支撐物。瓊脂糖凝膠約可辨別相差100bp的DNA片段，其區分率雖比聚丙烯酰胺凝膠低，但它製備簡單，結合範疇廣。一般瓊脂糖凝膠結合DNA的範疇為0.2-20kb，應用脈衝電泳，可結合高達10^7bp的DNA片段。
成員正在瓊脂糖凝膠中泳動時有點電荷效應和成員篩效應。DNA成員正在高於等電點的pH濾液中帶負點電荷，正在磁場中向陽極挪動。因為糖-鹽酸骨子正在構造上的反複本質，相反單位的雙鏈DNA簡直存正在等量的淨點電荷，因而它們能以異樣的速率向陽極位置挪動。
操作流水線編者
預備醃臢的配膠板和電泳槽
瓊脂糖凝膠電泳：程度電泳
瓊脂糖凝膠電泳：程度電泳
留意DNA酶淨化的儀表能夠會降解DNA，形成條帶信號弱、依稀以至缺失的景象。
電泳辦法
正常的核酸檢測隻要要瓊脂糖凝膠電泳就能夠；假如需求區分率高的電泳，尤其是隻要多少個bp的差異該當取舍聚丙烯酰胺凝膠電泳；用一般電泳沒有適合的碩大DNA鏈該當運用脈衝凝膠電泳。留意碩大的DNA鏈用一般電泳能夠跑沒有出膠孔招致缺帶。
凝膠深淺
關於瓊脂糖凝膠電泳，深淺一般正在0.5——2%之間，低深淺的用於停止大片段核酸的電泳，深奧淺的用於停止小片段綜合。低深淺膠易碎，不慎操作和運用品質好的瓊脂糖是處理方法。留意深奧淺的膠能夠使成員大小近似的DNA帶沒有易區分，形成條帶缺失景象。
緩衝液
罕用的緩衝液有TAE和TBE，而TBE比TAE有著更好的緩衝威力。電泳時氣用新製的緩衝液能夠顯然進步電泳成效。留意電泳緩衝液屢次運用後，離子強度升高，pH值下降，緩衝功能降落，能夠使DNA電泳發生條帶依稀和沒有規定的DNA帶遷徙的景象。
電壓和量度
電泳時電壓沒有該當超越20V/cm，電泳量度該當低於30℃，關於碩大的DNA電泳，量度該當低於15℃。留意假如電泳時電壓和溫渡過高，能夠招致湧現條帶依稀和沒有規定的DNA帶遷徙的景象。尤其是電壓太大能夠招致小片段跑出膠而湧現缺帶景象樣品的純度和形態留意樣品中含鹽量太高和含雜質卵白均能夠發生條帶依稀和條帶缺失的景象。酒精積澱能夠去除必要的鹽，用酚能夠去除卵白。留意變性的DNA樣品能夠招致條帶依稀和缺失，也能夠湧現沒有規定的DNA條帶遷徙。正在上樣前沒有要對於DNA樣品加熱，用20mM NaCl緩衝液濃縮能夠預防DNA變性。
的上樣
準確的DNA上樣量是條帶明晰的保障。留意太多的DNA上樣量能夠招致DNA帶型依稀，而太小的DNA上樣量則招致帶信號弱以至缺失。
的取舍
電泳定然要運用DNA Marker或者已知大小的正比例照DNA來約莫DNA片段大小。Marker該當取舍正在指標片段大小左近ladder較密的，那樣對於指標片段大小的約莫才比擬精確。需求留意的是Marker的電泳異樣也要相符DNA電泳的操作規範。假如取舍λDNA/HindIII或者許λDNA/EcoRI的酶切Marker，需求事後65℃加熱5min，冰上結冰後運用。從而防止HindIII或者EcoRI酶切形成的粘性接頭招致的片段聯接沒有規定或者條帶信號弱等景象。
凝膠的紡織和視察
試驗室罕用的核酸紡織劑是溴化乙錠（EB），紡織成效好，操作便當，然而穩固性差，存正在毒性。留意視察凝膠時應依據顏料沒有同運用適合的光源和激起跨度，假如激起跨度沒有對於，條帶則沒有易視察，湧現條帶依稀的景象。
回整編者
片段的膠回收辦法
電泳洗脫法
低熔點瓊脂糖凝膠電泳挖塊法
凍融回收法
玻璃奶回收法
柱回收法
膠回收容意須知
將電泳槽用ddH2O重複蕩滌醃臢，倒入鮮活配製的滅鼠電泳緩衝液；依據點樣量製備適合薄厚的瓊脂糖凝膠板；切膠時盡能夠切掉沒有含DNA片段的凝膠；
要過分縮小DNA正在紫外下的照耀工夫以縮小對於DNA的損害；熔膠要徹底。
